一般来说巯基生物素化的试剂还是挺常见的，巯基，即巯醇基（-SH），也是一类常用的生物素标记位点。在很多蛋白或者多肽中，巯基是以双硫键（有时是游离状态）形式存在于表面，还原后，以巯醇的方式选择性的和马来酰亚胺反应生成稳定的巯醚键。分析到这个加成反应在中性pH条件下，反应快，选择性高，属于常用生物标记反应。相对于氨基标记，巯基生物素化的标记位点仅限半胱氨酸，会有一定的局限性，标记对蛋白的生物活性影响较小。
巯基生物素化类型：Biotin-PEG-SH，Biotin-PEG-Thiol，MW：20000Biotin-PEG-SH，Biotin-PEG-Thiol，MW：10000Biotin-PEG-SH，Biotin-PEG-Thiol，MW：5000Biotin-PEG-SH，Biotin-PEG-Thiol，MW：2000Biotin-PEG-SH，Biotin-PEG-Thiol，MW：3400Biotin-PEG-SH，Biotin-PEG-Thiol，MW：1000
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